Thiết bị thanh lọc để thanh lọc Oligo

1. Tinh chế sắc ký điện di gel
Sử dụng sắc ký điện di gel polyacrylamide biến tính để tinh chế.Chất biến tính thường là formamide 4M hoặc urê 7M, nồng độ acrylamide nằm trong khoảng 5-15% và tỷ lệ methacrylamide chủ yếu nằm trong khoảng 2-10%.
Sau khi điện di, vị trí của dải axit nucleic cần được xác định dưới sự chiếu xạ của tia cực tím, gel chứa axit nucleic mục tiêu bị cắt bỏ, axit nucleic được đập vỡ và lọc, sau đó dung dịch lọc được cô đặc, khử muối, định lượng và đông khô.

2. DMT-On, Tinh chế HPLC
Chọn chế độ DMT-On trong quá trình tổng hợp, sản phẩm thô được ly tâm và cô đặc ở nhiệt độ phòng để loại bỏ lượng amoniac dư thừa sau quá trình amino phân.
Việc phân tách được thực hiện bằng cột C18 với axetonitril và axit triethylamine-axetic 10% (TEAA) làm dung môi rửa giải.Sau khi quá trình rửa giải hoàn tất, nó được cô đặc và sau đó nhóm DMT được loại bỏ bằng axit trifluoroacetic.Sau khi trung hòa, một số muối và phân tử nhỏ được loại bỏ qua ống cắt và cuối cùng được khử muối.

Phương pháp này có thể thu được sản phẩm có độ tinh khiết cao hơn, nhưng cần chú ý đến sự xuất hiện của quá trình khử purin.

3. Tắt DMT, tinh chế HPLC
Chọn DMT-Off trong quá trình tổng hợp và sản phẩm thô được ly tâm và cô đặc ở nhiệt độ phòng để loại bỏ amoniac dư thừa sau quá trình phân hủy ammon.
Việc phân tách được thực hiện bằng cột C18 với axetonitril và axit triethylamine-axetic 10% trong nước làm dung môi rửa giải.Sau khi quá trình phân tách hoàn tất và định lượng, các phần dịch được đông khô.

Phương pháp này yêu cầu điều chỉnh cẩn thận các điều kiện tách và cũng có thể thu được các phân tử mục tiêu tương đối tinh khiết.